细胞学实验专题

胎牛血清替换小技巧

2025-11-11

胎牛血清替换小技巧




大家都知道体外培养的细胞比较娇气,稍微改变培养的条件细胞就会有很大的不适应性。

在选择更高性价比的血清来替换原血清培养时,这就需要操作者本人按照比例替换血清培养。细胞培养切换两种血清你莫要着急,两种方法让你和你的细胞更受用!



通过系统性梯度替换与多维评价体系,可最大限度降低血清更换风险,保障实验数据连续性!

两种血清替换方法



方法1:适用细胞培养且来源一致不同品牌的血清。两种不同品牌血清的营养成分和各项指标参数之间有一定的差异,体外培养的细胞比较脆弱且娇贵,替换时选择比例梯度切换,获得较好的切换效果。新品牌胎牛血清替换原品牌胎牛血清进行细胞培养。通过传代培养,逐渐减少混合培养基中原FBS的比例,按照10%(20%)FBS+90%(80%)DMEM(1640)培养比列;例,体系中原10%FBS具体递减方案为:两种FBS1:FBS2,两者体积比,80%:20%、60%:40%、40%:60%、20%:80%和最终100%含新FBS2的培养基。继续传代后,细胞生长可恢复至原来的水平。


方法2:细胞都可通过序贯切换法获得较好的切换效果。将当前所用含胎牛血清培养基以1:1(v:v)的比例与含有新血清的培养基混合,用于细胞培养。通过传代培养,逐渐减少混合培养基中原培养基的比例,具体递减方案为:1:2、1:4、1:16和100%含新血清的培养基。每次改变血清组成时需将细胞传代培养2至3次以便细胞适应。另外也可将细胞由原胎牛血清直接切换至新的血清。开始时,新血清的使用浓度与原胎牛血清相同。这时,细胞可能会出现生长缓慢的现象。传代2-3代后,细胞生长可恢复至原来的水平。



血清试用方案设计

1. 试用周期:

基础周期:1-3周(根据细胞类型与实验需求调整)敏感细胞(如原代/干细胞):延长至4周,增加观察节点。

2.细胞预处理:

复苏阶段:使用原血清体系复苏细胞,待细胞状态稳定≥3代后开始替换测试;

冻存备份:正式替换前冻存2-3批次细胞,防止替换失败导致细胞系丢失;

梯度替换标准化流程:



适应期

血清配比(新:旧):20%:80%;

传代次数:1-2代;

关键监控指标:存活率、贴壁效率、倍增时间;



验证期

血清配比(新:旧):80%:20%

传代次数:2代

关键监控指标:克隆形成率、功能标志物表达



完全替换

血清配比(新:旧):100%新血清

传代次数:≥3代

关键监控指标:长期遗传稳定性,下游实验一致性

NEWZERUM巴西胎牛血清(FBSExcelent)

NEWZERUM巴西胎牛血清作为国内通过中国海关进口高标准的巴西来源胎牛血清, NEWZERUM巴西胎牛血清不仅一如既往的体现了我们的产品质量,并且我们还拥有完整、合规的进口手续,产品经过巴西农业和畜牧业部(Ministério da Agricultura e Pecuária-MAPA)以及中国海关总署批准,获得《巴西输华牛血液制品卫生证书》和《进境动植物检疫许可证》;同时产品也通过中国海关的现场查验和技术中心检测的多重验证合格,将研究者使用动物源性材料的风险降到最低。

来源于国家批准进口血源地“巴西”。该血清的生产经过三次0.1um过滤,广泛适用于各种常见细胞系培养,以及部分原代细胞、干细胞的培养。

产品名/货号

规格

目录价折后价

巴西优级胎牛血清FBS

Cat#FBS-BE500

500ml30001799


图片

试用装申请(仅限贵州省内)


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