产品概述 快速细胞冻存液(无血清)适用于绝大部分肿瘤细胞和常规细胞，也适用于大部分干细胞、原代细胞等(已测试 细胞种类请关注贝茵莱官网。 该冻存液不含动物源性蛋白和血清成分，无细菌、病毒和支原体等污染，确保冻存细胞的安全。其配方含有 DMSO、葡萄糖等多种细胞营养成分，提高细胞存活率和活力，也适合无血清培养的细胞和蛋白表达细胞的冻 存。本产品4℃即可稳定保存，无需-20℃冷冻保存。

常温运输：4℃储存，有效期24个月。

目前已验证的细胞：

HEK-293，293FT，K562，Hela，A549，CHO，HepG2，C2C12，MCF-7，Jurkat，Raji，RAW264.7，MSC，PC12，HEP3B，SNU-387，SNU-423，HLE，JHH-7，A375，A2058，A431，NCI-H460，COS7， DU145，

MDCK，NIH-3T3，769-P，HK-2，T24，M14，U87，U251，HCCLM3，Vero，MC3T3-E1，HCT116，H9C2，SiHa，SK-OV-3 等。

FAQ:

Q：传统细胞冻存-逐级降温

A：冷存管置于4℃-10分钟→→→ -20℃-30分钟→→→ -80℃-16～18小时（或隔夜）→→→液氮罐长期储存。-20℃不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，

惟存活率稍微降低一些。

Q：使用后复苏率还是很不错的，但是感觉细胞的状态没有用DMSO+血清的那么好

A：我们认为这种状态跟冻存液无关。细胞复苏率不错，说明细胞存活率很高；传统的血清冻存是有一个营养物质提供，但其实细胞在冻存时处于休眠状态，却基本不消耗营养物质，在我们的无血清细胞冻存液中也有足够葡萄糖成分。

那就可能是细胞在冻存前就已经处于饥饿状态，即做冻存的过程中脱离营养物质时间过长，这也是我们要求无血清冻存液要快速冻存的原因。

Q：贝茵莱生物快速细胞冻存液不如其他品牌的粘稠？

A：每个公司的配方不同，粘稠的一般采用聚丙烯醇，贝茵莱生物使用的聚乙二醇；我司测试下来认为低粘稠度会更方便客户做操作

Q：使用快速细胞冻存液，还需要放在冻存盒中么？

A：使用快速细胞冻存液属于瞬间冻存，千万不要再去拿冻存盒或加入其它物料进行梯度冻存，因为只有葡萄糖作为能量物质，再进行梯度，容易破坏细胞生存环境

Q：之前用快速冻存液，存在-80℃冰箱里面前2个月，复苏状态特别好；之后2个月，细胞就复苏不起来，是为什么？

A：如果存在这种情况，基本可以认定为冰箱在使用过程中，温度波动比较大。在很多实验室中，超低温冰箱不仅仅是用来存放细胞，还会存放一些样本，组员们会不断开关冰箱，导致冰箱内温度波动，

我们建议长期存放细胞还是使用液氮罐更稳当。

产品概述

快速细胞冻存液(无血清)适用于绝大部分肿瘤细胞和常规细胞，也适用于大部分干细胞、原代细胞等(已测试 细胞种类请关注贝茵莱官网。 该冻存液不含动物源性蛋白和血清成分，无细菌、病毒和支原体等污染，确保冻存细胞的安全。其配方含有 DMSO、葡萄糖等多种细胞营养成分，提高细胞存活率和活力，也适合无血清培养的细胞和蛋白表达细胞的冻 存。本产品4℃即可稳定保存，无需-20℃冷冻保存。

一、细胞冻存步骤 1. 使用常规方法收集对数期的贴壁细胞或悬浮细胞，并计数，确认所需冻存的细胞数量。 2. 将即冻存细胞收集于离心管中，1000 rpm离心5 min，收集细胞沉淀，并弃掉上清液。 3. 加入适量的冻存液至离心管中，最后的细胞保存浓度为5×10 5至1×10 7 /mL，轻柔混匀细胞，形成细胞混合液。 4. 将细胞混合液按1~1.5 mL每管分装于冻存管中。 5. 将冻存管直接置于-80℃保存，可长期保存。

二、细胞复苏步骤 1. 取出冻存细胞，立即放入37℃水浴槽快速解冻。 2. 待细胞混合液彻底解冻融化后，立即加入1mL细胞培养基，混合。 3. 将混合液移至含有约 5mL该细胞培养基的离心管中，1000 rpm，离心5 min，弃上清，获取细胞沉淀。 4. 加入适量的新鲜细胞培养基，轻柔混匀，并将混合液转移至培养容器，观察细胞状态正常后，进行后续细胞培 养工作。